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      • 所屬分類:
        衛(wèi)生專業(yè)考..
      • 作者:
        專家編寫組 編著
      • 出版社:
        北京科學(xué)技術(shù)出版社
      • ISBN:9787530455784
      • 出版日期:2014-1-1
      • 原價:
        ¥56.00元
        現(xiàn)價:¥0.00元
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      圖書簡介

        第三節(jié)  血紅蛋白測定
        [核心考點]氰化高鐵血紅蛋白測定法原理常考
        血液在血紅蛋白轉(zhuǎn)化液中溶血后,除SHb外各種血紅蛋白均可被高鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白,再與CN一結(jié)合生成穩(wěn)定的棕紅色氰化高鐵血紅蛋白。HiCN最大吸收波峰在540nm,最小吸收谷為504nm。特定標(biāo)準(zhǔn)條件下,毫摩爾消光系數(shù)為44mmol一。em一,因此根據(jù)標(biāo)本的吸光度,即求出血紅蛋白濃度。在沒有符合WHO標(biāo)準(zhǔn)的分光光度計的條件下,亦可用HiCN參考液制得標(biāo)準(zhǔn)曲線,或得出換算常數(shù),間接計算血紅蛋白濃度(曠L).
        [核心考點]氰化高鐵血紅蛋白測定法方法學(xué)評價常考
        HiCN法被列為國際血紅蛋白測定的參考方法。具有操作簡單、顯色快、穩(wěn)定,除SHb外各種血紅蛋白均可檢測、讀取吸光度后可直接定值等優(yōu)點。缺點是KCN有劇毒,使用管理不當(dāng)可造成公害,此外高白細(xì)胞和高球蛋白血癥可致混濁,以及HbCO轉(zhuǎn)化較慢等問題。
        [核心考點]氰化高鐵血紅蛋白測定法計算公式常考
        lib(曠L):A/44 x64458(mg)/1000 x251:A x367.7
        式中A是在540nm處HiCN吸光度,64458mg是Hb的毫克分子量,1000是將毫克轉(zhuǎn)換為克,251是實驗時血液的稀釋倍數(shù)。使用367.7常數(shù)是有條件的,是基于在儀器、比色杯、試劑及操作均嚴(yán)格的要求下,才能直接使用。
        [核心考點]氰化高鐵血紅蛋白測定法注意事項常考
        (1)轉(zhuǎn)化液應(yīng)儲存在棕色有塞玻璃瓶中,4~C可保存數(shù)月,不可0℃以下保存。
        (2)KCN有劇毒,測定后的廢液以水稀釋,再加以次氯酸鈉35ml/L,放置15小時以上。
        (3)白細(xì)胞過高或球蛋白異常可干擾檢測結(jié)果,白細(xì)胞過高離心后取上清液比色,球蛋白異常增高者比色液中加入少許固體NaCl或碳酸鉀,混勻后溶液澄清再比色。
        [核心考點]十二烷基磺酸鈉血紅蛋白測定法原理
        除SHb外,血液中各種Hb均可與低濃度SDS作用,生成SDS—Hb棕紅色化合物。其吸收曲線波峰:莊538nm,波谷在500nm,肩峰在560nm。由于摩爾消光系數(shù)尚未最后確認(rèn),因此不能用吸光度A直接計算ub濃度。本法可用HiCN法定值的抗凝血或溶血液,制備標(biāo)準(zhǔn)工作曲線,間接計算血紅蛋白濃度。
        [核心考點]十二烷基磺酸鈉血紅蛋白測定法方法學(xué)評價
        優(yōu)點:操作簡單,呈色穩(wěn)定,準(zhǔn)確性和精確性符合要求,無公害。為次選方法。
        缺點:SDS本身質(zhì)量差異較大且SDS破壞白細(xì)胞,不適于同時具有計數(shù)白細(xì)胞、Hb定量兩種功能和血細(xì)胞分析儀使用。
        [核心考點]疊氮高鐵血紅蛋白測定法
        具有與HiCN相似的優(yōu)點,最大吸收峰在542nm,且峰值高度幾乎與HiCN者重合,實驗時顯色快且穩(wěn)定。試劑毒性僅為HiCN測定法的1/7,但仍存在公害問題。
        [核心考點]堿羥血紅蛋白(AHD575)測定法
        該法試劑簡單,不含有毒劑。呈色穩(wěn)定,575nm為其檢出波長。可用氯化血紅素做標(biāo)準(zhǔn)品。但由于自動血細(xì)胞分析儀或血紅蛋白測定儀多采用540nm左右范圍濾光板(因為HiCN最大吸收峰在540nm),限制了此法在該類儀器的使用。
        [核心考點]沙利酸化血紅蛋白測定法
        操作簡單但誤差較大,已被列為縣以上醫(yī)院淘汰的實驗項目。
        [核心考點]參考值常考
        ……


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